皇冠体育app,官网,官方网站,官方网址

网站首页公司简介新闻中心产品展示技术文章人才中心在线留言联系我们
 
 
产品搜索
请输入产品名称或CAS号
产品分类
科研试剂
培养基
标准品和对照品
血液制品
实验耗材
染色液
试剂盒
实验室常用耗材
透析袋
新闻中心 您现在的位置:首 页 >> 新闻中心
对scFv基因文库及pHEN1噬菌体展示栽体的限制性消化
点击次数:888 发布时间:2012-12-29
 

[方法]
1,配制两个100ul PCR反应混合液来消化scFV文库,其中1个用于VH-VκscFv文库,另1个用于VH-Vλ scFv文库,该混合液含有:
●scFV DNA(1~4ug),50ul
●水,33ul
●10×NEB 3缓冲液,10ul
●乙酰BSA(100×),1.0ul
●Nco工(10U/ul),3.0f11
●NoJ工(10U/ul),3.0ul
2.37℃孵育反应液过夜。要用37℃孵育箱或者有加热盖的加热装置,防止水分蒸发。或者,可以按PCR反应那样加一层矿物油(Sigma)。
3.用1%琼脂糖胶纯化基因文库,并用Geneclean试剂盒提取DNA。重悬产物于30ul水中。在1%琼脂糖凝胶中,与已知大小和浓度的标准对照品比较,测定DNA浓度。
4.消化4ug氯化铯纯化的pHENl DNA以准备载体,其过程完全如上述消化scFv基因文库的流程,但须将scFvDNA替换为质粒DNA②。
5.用0.8%琼脂糖胶纯化已消化的载体DNA,再按处理scFv插入序列的方式,用Gene-clean自胶中提取载体片段。将产物重悬于30ul水中。在1%琼脂糖凝胶中,与已知大小和浓度的标准对照品比较,测定DNA浓度。

www.byzn.tw

 
版权所有:上海金穗生物科技有限公司 | ICP备案号:沪ICP备12014364号-1 | 技术支持:化工仪器网

化工仪器网

推荐收藏该企业网站

Sitemap

大满贯老虎机平台| AG百家乐| 皇冠体育投注官网|